一、引言
維生素 E 作為飼料中的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)添加劑，兼具抗氧化與生理調(diào)節(jié)功能，其含量直接影響畜禽生長(zhǎng)性能與產(chǎn)品品質(zhì)?，F(xiàn)行飼料中維生素 E 測(cè)定國(guó)標(biāo)方法以高效液相色譜法為主，但該方法存在儀器成本高、前處理復(fù)雜、檢測(cè)周期長(zhǎng)等問(wèn)題，難以滿足基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)及飼料企業(yè)的快速篩查需求。
佑科可見(jiàn)分光光度計(jì)憑借操作便捷、性價(jià)比高的優(yōu)勢(shì)，在食品營(yíng)養(yǎng)檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。本文以佑科 UV759S 可見(jiàn)分光光度計(jì)為檢測(cè)工具，建立飼料中維生素 E 的快速測(cè)定方法，通過(guò)優(yōu)化提取與顯色條件，驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確性與適用性，為飼料質(zhì)量快速監(jiān)測(cè)提供技術(shù)方案。 二、實(shí)驗(yàn)部分
（一）實(shí)驗(yàn)材料
儀器選用佑科 UV759S 可見(jiàn)分光光度計(jì)（波長(zhǎng)范圍 190-1100nm，吸光度精度 ±0.002A）、高速離心機(jī)、超聲波清洗器。試劑包括 α- 生育酚標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥99%）、無(wú)水乙醇（分析純）、正己烷（分析純）、聯(lián)吡啶（分析純）、三氯化鐵（分析純），實(shí)驗(yàn)用水為超純水。飼料樣品選取玉米型配合飼料、豆粕型濃縮飼料及預(yù)混合飼料，經(jīng)粉碎過(guò) 80 目篩后密封保存。
（二）實(shí)驗(yàn)方法
樣品前處理：稱取 2.0g 飼料樣品于離心管中，加入 15mL 無(wú)水乙醇 - 正己烷混合液（體積比 1:1），超聲提取 20min，8000r/min 離心 5min，取上清液備用，全程避光操作。
顯色反應(yīng)：取 2mL 上清液于比色管中，依次加入 1mL 0.2% 聯(lián)吡啶乙醇溶液、1mL 0.1% 三氯化鐵乙醇溶液，搖勻后靜置 5min，以空白試劑為參比。
檢測(cè)條件：通過(guò)佑科分光光度計(jì)波長(zhǎng)掃描，確定維生素 E - 聯(lián)吡啶 - 三氯化鐵絡(luò)合物的最大吸收波長(zhǎng)為 520nm，在此波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：配制 0.02、0.05、0.10、0.20、0.50mg/L 的 α- 生育酚標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，按上述顯色步驟操作，以濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
三、結(jié)果與分析
（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍
佑科可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)得的吸光度與維生素 E 濃度呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 y=1.862x+0.005，相關(guān)系數(shù) R2=0.9997，線性范圍為 0.02-0.50mg/L，滿足飼料中維生素 E（通常含量 0.01-0.80mg/g）的檢測(cè)需求，無(wú)需多次稀釋即可直接測(cè)定。
（二）方法適用性驗(yàn)證
對(duì)三種類型飼料樣品的測(cè)定結(jié)果顯示，該方法與國(guó)標(biāo)高效液相色譜法的相對(duì)偏差均小于 2.8%。其中玉米型配合飼料相對(duì)偏差 1.3%-2.5%，豆粕型濃縮飼料 1.1%-2.2%，預(yù)混合飼料 1.5%-2.8%，均處于允許誤差范圍內(nèi)。
針對(duì)飼料中常見(jiàn)的淀粉、粗蛋白、礦物質(zhì)等基質(zhì)，加標(biāo)實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)基質(zhì)濃度在常規(guī)飼料含量范圍內(nèi)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果相對(duì)偏差仍小于 3%，證明該方法抗基質(zhì)干擾能力較強(qiáng)，適用性廣泛。
（三）精度與快速性分析
重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中，對(duì) 0.10mg/L 和 0.30mg/L 標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行 6 次平行檢測(cè)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為 1.23% 和 0.98%；對(duì)同一飼料樣品連續(xù)測(cè)定 6 次，RSD 為 1.45%，均低于 5% 的精度要求。加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)中，回收率在 95.6%-103.5% 之間，平均回收率 99.2%，準(zhǔn)確性可靠。
該方法單個(gè)樣品前處理時(shí)間僅 25min，檢測(cè)時(shí)間不足 5min，相比國(guó)標(biāo)方法（前處理 120min 以上），檢測(cè)效率提升 4 倍以上，實(shí)現(xiàn) “快速測(cè)定" 目標(biāo)。
四、討論
佑科可見(jiàn)分光光度計(jì)憑借穩(wěn)定的波長(zhǎng)精度與吸光度響應(yīng)，為飼料維生素 E 快速測(cè)定提供了可靠?jī)x器支撐。實(shí)驗(yàn)優(yōu)化的超聲提取 - 絡(luò)合顯色體系，有效縮短了前處理時(shí)間，且能抵抗復(fù)雜基質(zhì)干擾。 但需注意，飼料中高含量油脂可能導(dǎo)致提取液渾濁，可通過(guò)加無(wú)水硫酸鈉除水改善；維生素 E 易氧化，樣品處理需全程避光。后續(xù)可進(jìn)一步優(yōu)化提取溶劑配比，拓展方法對(duì)高脂肪飼料的適用性。
五、結(jié)論
基于佑科可見(jiàn)分光光度計(jì)建立的飼料中維生素 E 快速測(cè)定方法，線性關(guān)系良好（R2=0.9997），對(duì)不同類型飼料均具有較強(qiáng)適用性，相對(duì)偏差小于 3%。方法精度優(yōu)異，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于 1.5%，加標(biāo)回收率達(dá) 95%-104%。
該方法操作簡(jiǎn)便，單個(gè)樣品檢測(cè)周期僅 30min，顯著優(yōu)于傳統(tǒng)方法，且儀器成本低、易維護(hù)，能夠滿足飼料企業(yè)質(zhì)量控制與基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)快速篩查的需求，具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
掃碼關(guān)注
